Tre belle studentesse universitarie vengono ingannate per entrare in un ostello dove i "padroni" amano torturare, stuprare e uccidere. Dopo un tour geografico della Slovacchia, tre donne vengono attirate in un ostello da un bel ragazzo che le vende ai padroni, i quali le legano e le fanno entrare in un mondo di dolore impensabile...
Dopo i notevoli incassi di Hostel del 2005, Roth ha concepito un sequel ambientato direttamente dopo gli eventi del primo film, scegliendo di includere tre protagoniste femminili per "alzare la posta". Le riprese si sono svolte nell'autunno del 2006 a Praga presso i Barrandov Studios, mentre altre riprese sono state effettuate in Islanda e in Slovacchia.
Bandito dalle sale cinematografiche di diversi paesi, Hostel: Part II è stato presentato in anteprima mondiale al Museum of the Moving Image di New York City il 6 giugno 2007 ed è uscito nelle sale degli Stati Uniti due giorni dopo, l'8 giugno. Il film ha guadagnato meno del suo predecessore al botteghino, incassando 17 milioni di dollari negli Stati Uniti alla fine della sua corsa nelle sale, mentre l'originale aveva guadagnato 19 milioni di dollari nel solo weekend di apertura. Prima dell'uscita nelle sale, una copia del film è trapelata su Internet e una pubblicazione dell'epoca ha affermato che si trattava del "film più piratato di sempre", cosa che Roth ha suggerito essere un fattore che ha influito sui risultati del film al botteghino.
Dopo gli eventi di Hostel, Paxton soffre di PTSD e vive in isolamento con la sua ragazza Stephanie. Dopo una discussione in cui Stephanie denuncia la paranoia di Paxton come esagerata e insopportabile, si sveglia e trova il suo cadavere senza testa nella loro cucina. Una scatola non contrassegnata contenente la testa mozzata di Paxton viene consegnata a Sasha, il capo di Elite Hunting.
A Roma, in Italia, tre studentesse d'arte americane, Beth, Whitney e Lorna, vengono convinte da Axelle, una modella di nudo che stanno ritraendo, a partecipare a una lussuosa vacanza termale in Slovacchia. Le quattro si registrano in un ostello, dove l'impiegato della reception carica di nascosto le loro fototessere su un sito web di aste. L'uomo d'affari americano Todd e il suo migliore amico Stuart vincono le offerte per Whitney e Beth. Si recano quindi in Slovacchia.
Più tardi, alla festa del raccolto del villaggio, Lorna scopre che Beth ha ereditato una grande fortuna da sua madre. Stuart e Todd partecipano alla festa; Todd osserva che Beth "le assomiglia", poi Stuart si avvicina a Beth e i due condividono una conversazione amichevole anche se strana. Nel frattempo, Lorna viene invitata da Roman, un uomo del posto, a fare un giro in barca. In una zona isolata a valle, Roman rapisce Lorna. Beth e Whitney lasciano il festival mentre Axelle si offre volontaria per aspettare Lorna.
Lorna si sveglia nuda e appesa a testa in giù sopra una vasca da bagno. Una donna entra nella stanza e la colpisce con una falce per raccogliere il suo sangue nella vasca. Poi si bagna nel sangue prima di tagliare la gola a Lorna. Nel frattempo, Beth, Whitney, Axelle e un uomo del posto, Miroslav, si recano in una spa per rilassarsi. Beth si appisola e si sveglia da sola senza i suoi effetti personali. Mentre cerca i suoi amici, viene inseguita da diversi uomini e fugge dalla spa. Nel bosco, subisce un'imboscata da una banda di violenti bambini di strada zingari, ma viene salvata da Sasha e Axelle; Sasha giustizia uno dei ragazzi per punizione.
Più tardi, nella villa isolata di Sasha, Beth viene inseguita dagli uomini di prima e capisce che sono associati a Sasha e Axelle. Cercando un nascondiglio, scopre una stanza piena di teste di trofei umani (una delle quali è quella di Paxton). Beth viene catturata e portata in una fabbrica abbandonata e legata in una stanza.
Beth viene presto raggiunta da Stuart, che dovrebbe ucciderla; si scopre che Todd, che è ricco mentre Stuart non lo è, ha pagato Beth per Stuart. Stuart sembra avere dei ripensamenti, slega Beth, spiega la situazione e dice di "non essere quel tipo di persona". Beth va alla porta per cercare di andarsene, ma qualcuno la stende.
In un'altra stanza, Todd terrorizza Whitney con una sega elettrica ma perde il coraggio dopo averle fatto accidentalmente lo scalpo senza ucciderla. Inorridito, Todd cerca di andarsene, ma viene informato che deve uccidere Whitney per andarsene. Dopo il rifiuto di Todd, le guardie sguinzagliano diversi cani che lo sbranano a morte.
Nel frattempo, Stuart, che ha messo al tappeto Beth, ha cambiato completamente idea e si è rivelato uno psicotico, intenzionato a torturare e uccidere Beth. Rivela che Beth assomiglia molto alla moglie di Stuart, che Stuart odia ma che non può uccidere perché è contro la legge e sarebbe il primo sospettato. Stuart inizia quindi a torturare Beth.
Con Todd ormai morto, il Club di Caccia d'Elite offre Whitney mutilata agli altri clienti per ucciderla, tra cui un vecchio italiano che sta mangiando Miroslav vivo. Stuart, dopo aver scoperto la morte di Todd, mostra a Beth le foto di Whitney mutilata per spaventarla, poi accetta l'offerta del club, lascia Beth e decapita Whitney.
Quando Stuart torna, Beth lo seduce e lo spinge a slegarla dalla sedia. Stuart tenta di violentarla, ma lei lo respinge e lo incatena alla sedia. Sasha e le guardie arrivano alla sua cella. Beth si offre di comprare la sua libertà con parte della sua eredità e, sebbene Stuart cerchi di superare la sua offerta, Sasha le rivela di sapere che Stuart non può permettersi di farlo. Sasha le dice che per andarsene deve anche uccidere qualcuno. Quando Stuart insulta Beth, lei gli taglia tutti i genitali e poi li dà in pasto ai cani, un atto che fa riflettere anche le guardie più avvilite e che lascia Stuart evirato e sanguinante. Soddisfatta, Sasha regala a Beth un tatuaggio dell'Elite Hunting, rendendola un membro ufficiale.
Quella notte, Axelle viene attirata dai bambini di strada zingari nel bosco, dove Beth le tende un'imboscata e la decapita. Poco dopo, i bambini iniziano a giocare a calcio con la testa mozzata di Axelle.